SBC Scientific - Môi trường nuôi cấy mô hoa Cúc

Môi trường nuôi cấy mô hoa Cúc

Nuôi cấy mô hoa cúc được áp dụng để sản xuất đồng loạt với số lượng lớn, sạch bệnh và độ đồng đều cao. Có thể sử dụng môi trường MS với tỷ lệ chất điều hòa sinh trưởng thích hợp để nuôi cấy hoa Cúc.

moi-truong-nuoi-cay-cuc.jpg

SƠ LƯỢC VỀ HOA CÚC

  Hoa Cúc với danh pháp khoa học : Chrysanthemum là một chi thực vật có hoa trong họ Cúc ( Asteraceae). Hoa cúc đã được trồng tại Trung Quốc từ 1.500 năm trước Công nguyên. Sau nhiều thế kỷ, số lượng giống cây tăng lên rất nhiều. Với nhiều công dụng hữu ích (làm thuốc, thực phẩm, trang trí…). Hoa Cúc đã in đậm dấu ấn vào văn hóa của nhiều quốc gia..

ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI 

1. Rễ: Là cây thuộc hệ rễ chùm, phát triển theo chiều ngang phân bố ở tầng đất mặt từ 5-20 cm.
2. Thân:thuộc cây thân thảo, nhiều đốt giòn, khi cây trưởng thành nên làm giàn để cây khỏi đổ.
3. Lá: Hình dạng, màu sắc, phiến lá cúc khác nhau tùy theo mỗi giống cây, đa phần là lá đơn.
4. Hoa: Hoa Cúc chủ yếu có 2 dạng.
+ Hoa lưỡng tính ( có cả nhị đực và nhị cái)
+ Hoa đơn tính (Chỉ có nhị đực hoặc nhị cái)

Hoa cúc chính gồm nhiều hoa nhỏ gộp lại trên một cuống hoa. Tùy theo mục đích sử dụng mà có thể để một bông hay nhiều bông trên cành.
Đường kính bông hoa phụ thuộc vào giống:
+ Giống hoa to: Đường kính 10-12cm (Pha lê, Đại Đóa…)
+ Giống hoa trung bình: Đường kính 5-7cm (Thọ đỏ, Đỏ nhung…)
+ Giống hoa nhỏ: Đường kính 1-2cm ( Chi trắng, chi vàng…).

CÁC YẾU TỐ MÔI TRƯỜNG ĐỐI VỚI HOA CÚC

1. Nhiệt độ

Nhiệt độ  thích hợp đối với đa phần các dòng hoa cúc là từ 20-250C.

2. Ánh sáng

Ánh sáng là điều kiện thiết yêú đến sự ra hoa và phát triển mầm hoa của cây hoa Cúc. Với mỗi thời kỳ sinh trưởng và phát triển của cây sẽ có cường độ ánh sáng khác nhau:
+ Thời kỳ cây con: Khi mới ra rễ lượng ánh sáng cần ít vì lúc này cây sử dụng các chất dinh dưỡng dự trữ.
+ Thời ky chuẩn bị phân cành: Đây là giai đoạn quang hợp mạnh ở cây để tạo ra các chất hữu cơ cần thiết, nên cây cần nhiều ánh sáng.
Cúc được xếp vào lọai cây ngắn ngày: thời kỳ để phân hóa mầm thường tốt nhất là 10 giờ chiếu sáng trên ngày với nhiệt độ giao động từ 20-25oC
- Thời gian chiếu sáng kéo dài thì thời gian sinh trưởng của cây hoa Cúc dài hơn, thân cao, lá tô, chất lượng hoa tăng. Ngược lại, chiếu sáng ngắn thì sẽ kích thích phân hóa mầm hoa sớm: cây ngắn, chất lượng hoa kém.

3. Ẩm độ

- Độ ẩm thích hợp nhất cho cây sinh trưởng phát triển là độ ẩm đất 60-70%, độ ẩm không khí 60-65%. Nếu độ ẩm trên dưới 80% cây sinh trưởng mạnh nhưng dễ phát sinh sâu bệnh làm ảnh hưởng năng suất, chất lượng hoa.

MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY HOA CÚC

Chuẩn bị môi trường 
 Pha dung dịch mẹ
 
MS1A Lấy 20 ml cho 1 liter dung dịch nuôi cấy
mg/l mM g/l  
1 KNO3 1900,00 18,79 95  
2 NH4NO3 1650,00 20,61 82,5  
3 KH2PO4 170,00 1,25 8,5  
MS1B Lấy 20 ml cho 1 liter dung dịch nuôi cấy
mg/l mM mg/l  
1 MnSO4.H2O 16,900 100,00 845  
2 ZnSO­4­.7H2O 8,600 29,91 430  
3 H3BO3 6,200 100,27 310  
4 KI 0,830 5,00 41,5 41,5 ml/L
5 Na2MoO4.2H2O 0,250 1,03 12,5 12,5 ml/L
6 CuSO4.5H2O 0,025 0,10 1,25 1,25 ml/L
7 CoCl.6H2O 0,025 0,11 1,25 1,25 ml/L
MS2 Lấy 20 ml cho 1 liter dung dịch nuôi cấy
mg/L mM g/l molecular weight
1 CaCl2 332,02 2,99 16,601 110,98
or CaCl2.2H2O 439,82 2,99 21,991 147,014
or CaCl2.6H2O 655,12 2,99 32,771 219,08
MS3 Lấy 20 ml cho 1 liter dung dịch nuôi cấy
mg/l mM g/l molecular weight
1 MgSO4 180,54 1,50 9,027 120,37
or MgSO4.7H2O 369,67 1,5 18,4835 246,47
MS4 Lấy 20 ml cho 1 liter dung dịch nuôi cấy
mg/l mM g/l  
1 Na2EDTA 37,3 100 1,865  
2 FeSO4.7H2O 27,8 100 1,39  
MS5 Lấy 20 ml cho 1 liter dung dịch nuôi cấy
mg/l mM mg/l  
1 Myo-inositol 100,00 554,94 5000  
2 Thiamine HCL (B1) 0,10 0,30 5  
3 Pyridoxine HCL (B6) 0,50 2,43 25  
4 Nicotinic acid 0,50 4,06 25  
5 Glycine 2,00 26,64 100  
             
 
 
Sau khi cân hoá chất xong cho vào lọ thuỷ tinh và cho 500 ml nước cất vào ,đặt lên máy khuấy tan rồi đổ vào bình có ghi tên( ký hiệu) từng loại dung dịch.

 Pha môi trường:
Sau đó ta lấy 20ml từ mỗi bình ở phía trên cho vào 1 bình, tỷ lệ này cho 1 lít dung dịch môi trường. Cho lượng agar là 1g/L, 1mg BAP, sau đó chuẩn pH 5.8. Trong quá trình thêm các loại dung dịch vào nên để trên máy khuấy cho hóa chất được trộn đều với nhau. Sau đó đem đi hấp tiệt trùng ở nhiệt độ 121oC, trong 15 phút và áp suất là 1 atm.

CHUẨN BỊ MẪU CẤY

 Mẫu hoa cúc : Cúc được nuôi cấy từ tràng hoa.
- Lựa chọn những cúc to khẻo, không bị bệnh.
- Tách từng tràng hoa ra, có thể để lại lớp ngoài cùng.
1. Rửa sạch trong Ethanol 70%
2. Khử trùng với 20% chất tẩy ( 5% NaClO) nhỏ thêm vài giọt trên bề mặt với Tween 20 trong 15 phút. Lắc bình thường.
3. Chuyển mẫu vào một bình tiệt trùng
4. Rửa sạch 3-5 lần với nước cất vô trùng ( sdH20)
5. chuyển mẫu vô trùng vào đĩa petri vô trùng ( chứa giấy thấm)
6. Cô lập mẫu với kẹp và dao
7. Đậy nắp đĩa tránh bị mất nước

Tham khảo môi trường MS, môi trường Knudson C Orchid, môi trường WV5, môi trường Nitsch


Thông tin liên hệ: 
SBC Scientific
Hotline: 0945677929
Email: info@sbc-vietnam.com

Nhà phân phối